Thể tế bào nhẫn là gì? Các công bố khoa học về Thể tế bào nhẫn

Hội nghị trọng điểm lần thứ nhất đã được tổ chức tại Stockholm, Thụy Điển, từ ngày 2–5 tháng 9 năm 2003. Mục tiêu của hội nghị là tích hợp các quan điểm lâm sàng và dịch tễ học về chủ đề Rối loạn Nhận thức Nhẹ (MCI). Một nhóm chuyên gia quốc tế, đa ngành đã thảo luận về tình trạng hiện tại và các hướng đi trong tương lai của MCI, liên quan đến biểu hiện lâm sàng, đánh giá nhận thức và chức năng, cũng như vai trò của chẩn đoán hình ảnh thần kinh, sinh dấu và di truyền học. Nhóm làm việc quốc tế đã tiến hành thảo luận về những đồng thuận mới, cũng như đưa ra các khuyến nghị cho việc quản lý và nghiên cứu trong tương lai. Các khuyến nghị cụ thể cho các tiêu chí MCI chung bao gồm: (i) người bệnh không phải là người bình thường cũng không phải là người mất trí; (ii) có bằng chứng về sự suy giảm nhận thức được thể hiện bởi sự suy giảm được đo lường khách quan theo thời gian và/hoặc báo cáo chủ quan về sự suy giảm của chính bản thân và/hoặc người cung cấp thông tin, cùng với các thiếu hụt nhận thức khách quan; và (iii) các hoạt động sinh hoạt hàng ngày được bảo tồn và các chức năng công cụ phức tạp vẫn intact hoặc chỉ suy giảm ở mức tối thiểu.

Các trình tự lặp lại ngắn được phân tách thường xuyên (CRISPR) và các protein liên quan đến chúng (CAS) cấu thành một hệ thống phòng vệ chống virus mới mẻ phổ biến trong các prokaryotes. Các trình tự lặp lại được phân tách bởi các đoạn không mã hóa (spacer), một số đoạn trong số đó tương đồng với các trình tự trong các yếu tố di truyền di động. Mặc dù toàn bộ quá trình liên quan vẫn chưa được xác định rõ ràng, nhưng người ta đã biết rằng các đoạn không mã hóa mới được đưa vào vị trí CRISPR của vật chủ trong suốt thách thức từ virus (phage), giúp tạo ra khả năng kháng lại virus một cách đặc hiệu. Hơn nữa, đã được chứng minh rằng sự can thiệp như vậy dựa trên các RNA nhỏ mang theo các đoạn không mã hóa. Những RNA này sẽ hướng dẫn hệ thống bảo vệ tới các phân tử bên ngoài mang theo các trình tự phù hợp với các đoạn không mã hóa. Dù vai trò này là rất thiết yếu, nhưng cơ chế tiếp nhận các đoạn không mã hóa vẫn chưa được giải quyết. Một bước tiến đầu tiên đến từ việc phát hiện các động thái liên quan đến các nguyên liệu đoạn không mã hóa (proto-spacers) của Streptococcus thermophilus, cho thấy sự nhận diện đặc hiệu của các trình tự cho người hiến tặng trong loài này. Tại đây, chúng tôi cho thấy rằng sự bảo tồn của các động thái kề bên proto-spacer (PAMs) là một chủ đề phổ biến cho các hệ thống CRISPR đa dạng nhất. Chuỗi PAM phụ thuộc vào biến thể CRISPR-CAS, ngụ ý rằng có một sự lựa chọn đặc hiệu liên quan đến loại CRISPR (hướng theo động thái) cho các đoạn không mã hóa, điều này sau đó xác định mục tiêu sự can thiệp. PAMs cũng hướng dẫn định hướng của các đoạn không mã hóa trong các dãy lặp lại. Đáng chú ý, các quan sát dựa trên tính cực như vậy cho thấy sự tránh xa sẽ xảy ra đối với việc nhận diện các nguyên liệu đoạn không mã hóa trên các phân tử RNA được phiên mã như một quy luật chung.

Đặt vấn đề —Tích tụ lipid quá mức trong đại thực bào đóng vai trò quan trọng trong sự phát triển của xơ vữa động mạch. Gần đây, chúng tôi đã phát hiện một protein huyết tương đặc hiệu cho tế bào mỡ, adiponectin, có nồng độ giảm ở bệnh nhân mắc bệnh động mạch vành. Chúng tôi đã chứng minh rằng adiponectin đóng vai trò như một điều chỉnh đối với các tác nhân gây viêm và ức chế sự bám dính của tế bào đơn nhân vào tế bào nội mô. Nghiên cứu hiện tại đã điều tra tác động của adiponectin lên tích tụ lipid trong đại thực bào lấy từ tế bào đơn nhân người.

Phương pháp và Kết quả —Các tế bào đơn nhân người được biệt hóa thành đại thực bào bằng cách ủ trong huyết thanh loại AB của người trong 7 ngày, và các tác động của adiponectin được nghiên cứu ở các khoảng thời gian khác nhau. Việc điều trị với nồng độ adiponectin sinh lý đã làm giảm nội bào cholesterol ester, được xác định bằng phương pháp enzym và huỳnh quang. Các đại thực bào được điều trị với adiponectin chứa ít giọt lipid nhuộm bởi dầu đỏ O hơn. Adiponectin ức chế sự biểu hiện của thụ thể scavenger lớp A (MSR) ở cả mức độ mRNA và protein qua phân tích Northern và phân tích immunoblot, mà không ảnh hưởng đến sự biểu hiện của CD36, được định lượng bằng phương pháp cytometry dòng chảy. Adiponectin làm giảm hoạt động trình diện promoter MSR lớp A, được đo bằng bài thử luciferase báo cáo. Điều trị bằng adiponectin giảm hoạt động gắn kết và thu nhận ligand MSR lớp A theo liều. Mức độ mRNA của lipoprotein lipase như một dấu hiệu của sự biệt hóa đại thực bào đã giảm bởi điều trị với adiponectin, nhưng mức độ của apolipoprotein E không có sự thay đổi. Adiponectin được phát hiện xung quanh các đại thực bào trong động mạch chủ bị tổn thương ở người thông qua hóa mô miễn dịch.

Kết luận —Protein huyết tương do tế bào mỡ sản sinh adiponectin đã ức chế sự chuyển đổi từ đại thực bào sang tế bào bọt, gợi ý rằng adiponectin có thể hoạt động như một điều chỉnh cho sự chuyển đổi từ đại thực bào sang tế bào bọt.

Virus Epstein-Barr (EBV) gây ra lymphoma tế bào tủy vô hại có thể gây tử vong cho đến 25% trẻ em nhận ghép tủy xương từ những người hiến tặng không có liên quan hoặc không tương thích HLA. Bởi vì biến chứng này có vẻ phát sinh từ sự thiếu hụt tế bào T độc đặc hiệu với EBV, chúng tôi đã đánh giá sự an toàn và hiệu quả của các dòng tế bào T đa dòng (CD4+ và CD8+) lấy từ người hiến tặng như là một biện pháp phòng ngừa miễn dịch và điều trị cho lymphoma liên quan đến EBV. Chín mươi chín bệnh nhân được xem là có nguy cơ cao bị lymphoma do EBV đã nhận từ 2 đến 4 lần truyền tĩnh mạch tế bào lympho T đặc hiệu với EBV từ người hiến tặng, sau khi họ đã nhận tủy xương đã được tách tế bào T từ những người hiến tặng không tương thích HLA (n = 33) hoặc thành viên trong gia đình không tương thích (n = 6). Các hiệu ứng miễn dịch của liệu pháp này đã được theo dõi trong và sau các lần truyền. Các tế bào truyền vào được xác định qua việc phát hiện gen dấu hiệu neo. Tế bào T đặc hiệu với EBV mang dấu hiệu neo đã được xác định trong tất cả trừ 1 bệnh nhân. Phân tích DNA theo chuỗi đã phát hiện gen dấu hiệu trong thời gian dài tới 18 tuần trong các tế bào đơn nhân máu ngoại vi không bị can thiệp và kéo dài tới 38 tháng trong các dòng tế bào T độc đặc hiệu với EBV đã được tái tạo. Sáu bệnh nhân (15.5%) có lượng DNA-EBV tăng mạnh tại thời điểm vào học (>2,000 bản sao genome/106 tế bào đơn nhân), cho thấy sự nhân bản EBV không kiểm soát, một biến chứng có mối tương quan cao với sự phát triển sau này của bệnh lymphoma rõ ràng. Tất cả các bệnh nhân này đều có sự giảm 2 đến 4 log trong nồng độ DNA virus trong vòng 2 đến 3 tuần sau khi truyền và không ai phát triển lymphoma, xác nhận hoạt động kháng virus của tế bào từ người hiến tặng. Không có tác dụng độc hại nào có thể quy cho liệu pháp tế bào T phòng ngừa. Hai bệnh nhân khác không nhận liệu pháp phòng ngừa và phát triển lymphoma tế bào tủy rõ ràng đã phản ứng hoàn toàn với việc truyền tế bào T. Các dòng tế bào T đa dòng lấy từ người hiến tặng đặc hiệu với các protein của EBV có thể được sử dụng một cách an toàn để phòng ngừa lymphoma tế bào tủy do EBV sau khi ghép tủy xương đồng loại và cũng có thể hiệu quả trong điều trị bệnh đã thiết lập.

Hiệu ứng ức chế đã được quan sát trước đó (Walter, et al. 1981 J. Cell Biol. 91:545-550) của SRP lên sự dịch mã mRNA cho protein tiết (preprolactin) không cần tế bào đã được chứng minh ở đây là do sự ngừng kéo dài chuỗi polypeptide được gây ra bởi tín hiệu chuỗi ngừng đặc hiệu vị trí. Khối lượng phân tử (Mr) của chuỗi preprolactin mới tổng hợp bị ngừng lại bởi SRP ước tính là 8,000, tương ứng với khoảng 70 dư lượng amino acid. Bởi vì tín hiệu chuỗi của preprolactin bao gồm 30 dư lượng và khoảng 40 dư lượng của chuỗi mới tổng hợp bị ẩn (được bảo vệ khỏi protease) trong tiểu đơn vị ribosome lớn, chúng tôi kết luận rằng tác động của SRP với peptide tín hiệu amino-đa đầu của chuỗi mới tổng hợp (thoát ra từ tiểu đơn vị ribosome lớn) đã điều chỉnh quá trình dịch mã và do đó gây ra sự ngừng kéo dài chuỗi. Sự ngừng này được giải phóng khi có sự gắn kết do SRP trung gian của các ribosome bị ngừng kéo dài với màng vi thể, dẫn đến việc hoàn thành chuỗi và chuyển vị vào túi vi thể.

Liệu pháp miễn dịch nhận định sử dụng tế bào T tự thân được trang bị thụ thể kháng nguyên giả (CAR) đã nổi lên như một phương thức mạnh mẽ trong việc điều trị ung thư. Tuy nhiên, một hạn chế của phương pháp này là tế bào T CAR tự thân phải được sản xuất theo yêu cầu cá nhân. Tại đây, chúng tôi cho thấy rằng việc điện chuyển RNA mRNA của nuclease hiệu ứng-like activator (TALEN) cho phép chỉnh sửa gen đa dạng một cách hiệu quả trong tế bào T người nguyên phát. Chúng tôi sử dụng phương pháp chỉnh sửa do TALEN điều khiển để phát triển quy trình sản xuất quy mô lớn tế bào T thiếu hụt biểu hiện cả thụ thể tế bào T αβ (TCR) và CD52, là một protein nhằm vào alemtuzumab, một tác nhân hóa trị liệu. Về mặt chức năng, tế bào T được sản xuất bằng quy trình này không gây ra phản ứng graft-versus-host (GVHD) và được làm cho kháng lại sự hủy diệt bởi alemtuzumab. Những đặc điểm này cho phép việc truyền alemtuzumab cùng lúc hoặc trước khi các tế bào T được thiết kế, hỗ trợ sự kết hợp của chúng. Hơn nữa, việc trang bị cho các tế bào được thiết kế bằng TALEN một CAR CD19 đã dẫn đến sự tiêu diệt hiệu quả mục tiêu khối u CD19+ ngay cả khi có mặt của tác nhân hóa trị liệu. Những kết quả này chứng minh tính khả thi của chỉnh sửa gen do TALEN điều khiển cho một quy trình có thể mở rộng, cho phép sản xuất các liệu pháp miễn dịch tế bào CAR từ bên thứ ba nhằm vào các mục tiêu tùy ý. Do đó, liệu pháp miễn dịch tế bào CAR có thể được sử dụng theo kiểu “sẵn có” giống như các chế phẩm sinh học khác.

Chúng tôi đã chứng minh gần đây rằng một gen bảo tồn tiến hóa LAZ3, mã hóa một protein ngón tay kẽm, bị phá vỡ và biểu hiện quá mức trong một số u lympho B (chủ yếu có thành phần tế bào lớn) cho thấy sự tái sắp xếp nhiễm sắc thể liên quan đến 3q27. Vì các điểm đứt trong những tái sắp xếp này tập trung trong một cụm chuyển đoạn chính (MTC) hẹp trên nhiễm sắc thể 3, chúng tôi đã sử dụng các dò di truyền từ khu vực này để nghiên cứu các sự tái sắp xếp phân tử của LAZ3 trong một loạt các bệnh nhân (217) với u lympho không Hodgkin (NHL). Phân tích blot Southern cho thấy sự tái sắp xếp của LAZ3 trong 43 bệnh nhân (19,8%). Sự tái sắp xếp được tìm thấy ở 11 trong 84 bệnh nhân (13%) với u nang nang nhưng phổ biến nhất trong u lympho ác tính (dạng hỗn hợp khuếch tán, tế bào lớn khuếch tán, và tế bào lớn miễn dịch bào), trong đó 31 trong 114 bệnh nhân (27%) bị ảnh hưởng. Tỷ lệ cao nhất của sự thay đổi LAZ3 đã được quan sát thấy trong u lympho B ác tính (26 trong 71 trường hợp, 37%). Mười một trong số 32 bệnh nhân có bất thường nhiễm sắc thể 3q27 không có sự tái sắp xếp của LAZ3, gợi ý khả năng có sự tham gia của LAZ3 ngoài MTC. Mặt khác, 18 trong số 39 bệnh nhân có sự tái sắp xếp LAZ3 và kết quả tế bào học sẵn có không có sự đứt gãy nhiễm sắc thể rõ ràng tại 3q27, gợi ý rằng gần một nửa số sự tái sắp xếp không thể phát hiện bằng phương pháp tế bào học. Không có sự liên kết thống kê nào có thể được tìm thấy giữa tình trạng LAZ3 và các đặc điểm ban đầu của bệnh hoặc kết quả lâm sàng trong u lympho nang hay u lympho ác tính. Chúng tôi kết luận rằng sự thay đổi LAZ3 là một sự kiện tương đối thường gặp trong u lympho B, đặc biệt trong các khối u có mô học ác tính. Nó có thể được sử dụng như một dấu ấn di truyền của bệnh, và cần có thêm các nghiên cứu để làm rõ các tác động lâm sàng của những thay đổi này.

ĐỀ CẬP: Việc truyền máu chỉ với các tế bào hồng cầu (RBCs) phù hợp kiểu hình đã được khuyến cáo để giảm tỷ lệ xảy ra hiện tượng tạo kháng thể allo đối với các kháng nguyên nhóm máu ở bệnh nhân mắc bệnh hồng cầu hình liềm (SCD).

THIẾT KẾ NGHIÊN CỨU VÀ PHƯƠNG PHÁP: Lợi ích dự kiến của việc phù hợp kiểu hình được xác định bằng cách xác định các kháng thể allo nhóm máu hiện có ở bệnh nhân SCD đã nhận truyền máu thông thường, mà không được tạo ra nếu họ chỉ nhận tế bào hồng cầu phù hợp kiểu hình. Bằng cách sử dụng các kháng thể allo của mỗi bệnh nhân làm cơ sở, có thể xác định các kháng thể allo cụ thể không được tạo ra nếu sử dụng một trong năm quy trình phù hợp kiểu hình khác nhau.

Chúng tôi đã phát triển flowMeans, một phương pháp hiệu quả về thời gian và chính xác để tự động xác định các quần thể tế bào trong dữ liệu phân tích dòng chảy (FCM) dựa trên phân cụm K-means. Khác với K-means truyền thống, flowMeans có thể xác định các quần thể tế bào lõm bằng cách mô hình hóa một quần thể duy nhất với nhiều cụm. flowMeans sử dụng một thuật toán phát hiện điểm thay đổi để xác định số lượng tiểu quần thể, cho phép phương pháp này được sử dụng trong các quy trình phân tích dữ liệu FCM với quy mô lớn. Cách tiếp cận của chúng tôi cho kết quả so với phân tích thủ công của các chuyên gia con người và các thuật toán phân loại tự động tiên tiến hiện tại. flowMeans được cung cấp miễn phí dưới dạng gói mã nguồn mở R thông qua Bioconductor. © 2010 Hiệp hội Quốc tế Phát triển Phân tích tế bào.